CARACTERIZAÇÃO E SELEÇÃO DE BACILLUS THURINGIENSIS PRESENTES EM PLANTAS DE CANA-DE-AÇÚCAR COM POTENCIAL ENTOMOPATOGÊNICO A TELCHIN LICUS LICUS (BROCA GIGANTE)
cana-de-açúcar, controle biologico, broca gigante, bactéria entomopatogenicas, Bacillus thuringiensis
O Brasil é o maior produtor de cana-de-açúcar do mundo, ainda assim existem muitas perdas de produção que podem ser ocasionadas tanto por fatores ambientais como por fatores entomológicos. A praga Telchin licus licus (broca gigante) tem maior ocorrência na região Nordeste e seu controle é bastante difícil, já que a larva fecha o orifício ocado logo após o corte da cana, o que torna o controle químico ineficiente. A catação manual é o único método eficiente, mas os custos com mão-de-obra são muito elevados. O uso de Bacillus thuringiensis como alternativa ao controle químico tem se mostrado bastante eficiente, sendo este o microorganismo utilizado com maior sucesso no controle de insetos. Diante do exposto, este projeto de pesquisa tem como objetivo isolar bactérias da espécie B. thuringiensis do líquido do apoplasto de plantas de cana-de-açúcar, de raízes, do cilindro central e de larvas da broca gigante e estudar a capacidade entomopatogênica dessas bactérias contra larvas da broca gigante. Para identificação das espécies de Bacillus será feito coloração de Gram, avaliação da produção de esporos pelos isolados. Estudo da diversidade bacteriana de Bacillus presentes nas plantas de cana-de-açúcar e no intestino da broca gigante será realizado, utilizando a técnica de REP-PCR. Os isolados bacterianos serão caracterizados taxonomicamente através da amplificação e sequenciamento da região 16S RNAr. Os isolados que apresentarem sequências similares a sequências de B. thuringiensis depositadas no banco de dados, terão o DNA amplificado utilizando iniciadores específicos para amplificação de genes cry. Será realizado também a avaliação da capacidade das bactérias em colonizar os tecidos de cana-de-açúcar e, além disso, serão realizados ensaios in vitro, onde as larvas serão alimentadas com dieta artificial inoculada com a bactéria, ensaio in vivo, em que as larvas serão alimentadas com colmos inoculados com a bactéria e ensaios em áreas produtoras de cana-de-açúcar afetadas com a praga. Ao fim desses ensaios, será avaliado a taxa de mortalidade das larvas e, com os resultados obtidos, será feito a seleção das estirpes mais promissoras para serem utilizadas no controle da broca gigante em casa-de vegetação e campo.