Estudo da Influência do Transportador de Aminoácidos AAP1 no Metabolismo Geral de Nitrogênio em Arabidopsis thaliana
Aminoácidos, Arabidopsis thaliana, AtAAP1, Metabolismo de nitrogênio.
Sabe-se que o nitrogênio absorvido pelas plantas é assimilado sob a forma de aminoácidos, que também podem estar presentes em concentrações expressivas em alguns solos e através deles ser absorvido diretamente pelas plantas. Estudos recentes têm investigado a localização e função de proteínas transportadoras de aminoácidos a fim de compreender melhor a atuação das mesmas no metabolismo vegetal. Com o objetivo de elucidar a relevância da participação do transportador AAP1 no metabolismo geral de nitrogênio em plantas, duas linhagens de Arabidopsis thaliana geneticamente transformadas para a expressão do gene AtAAP1 foram submetidas a análises para avaliação de expressão dos genes relativos aos transportadores de nitrato NRT2.1 e NRT1.1 e de aminoácidos AAP6 e AAP8, com o objetivo de investigar o possível efeito existente sobre a atividade dos mesmos em condições de baixa concentração externa de nitrato. Para tanto, foi realizado um experimento de cultivo hidropônico em fitotron nas instalações do Departamento de Solos da UFRRJ. O experimento contou com 4 tanques de hidroponia por variedade. Cada tanque recebeu 12 plantas e foi admitido como uma repetição, havendo 4 no total. As plantas foram cultivadas durante 45 dias em solução de 10 mM de NO3- e 1 mM de NH4+. Antes da coleta, as mesmas passaram para uma solução sem nenhuma fonte de N, onde permaneceram por 5 dias. Ao final do quinto dia foram submetidas a uma solução de cultivo contendo 0,1 mM de NO3- como única fonte de N e após 4 horas foi realizada a coleta. Por ocasião da coleta, as plantas de cada tanque hidropônico formaram uma amostra composta e foram separadas em raiz e parte aérea. Uma parte foi destinada às análises de fração solúvel e atividade da NR e a outra armazenada em N líquido para posterior análise de expressão dos genes AtAAP6, AtAAP8, AtNRT1.1, AtNRT2.1 e ATNAR2.1. Os resultados obtidos demonstraram que a ausência de atividade do transportador de aminoácidos AAP1 é acompanhada da redução de atividade de outros dois transportadores da mesma filogenia, a saber AAP6 e AAP8, como estratégia para evitar o acúmulo de aminoácidos na raiz.