Banca de DEFESA: BÁRBARA DE SOUZA CARDOSO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : BÁRBARA DE SOUZA CARDOSO
DATA : 11/07/2025
HORA: 10:00
LOCAL: Instituto de Química, sala 49
TÍTULO:

O PAPEL DOS INIBIDORES DE NADPH OXIDASES VAS2870, SETANAXIB E GKT NAS ATIVIDADES DA LFR1 DE Leishmania amazonensis E POSSÍVEL INFLUÊNCIA NA INFECÇÃO E DIFERENCIAÇÃO DO PARASITO

PALAVRAS-CHAVES:

Leishmania amazonensis, NADPH oxidases, LFR1

PÁGINAS: 75
RESUMO:

A espécie Leishmania amazonensis ocorre em várias partes do Brasil e é o agente causador da Leishmaniose Cutânea, transmitida por insetos vetores flebotomíneos para hospedeiros vertebrados. Durante o ciclo de vida do parasito, há uma alternância entre as formas promastigotas, presentes no vetor, e as formas amastigotas infectivas intracelulares, que surgem da diferenciação dos promastigotas metacíclicos no hospedeiro mamífero. Recentemente, foi descrito que a enzima ferro redutase (LFR1) de L. amazonensis, quando ativada por heme, também pode atuar como uma NADPH oxidase (NOX). Esta enzima bifuncional parece estar envolvida no processo de diferenciação do parasito e pode constituir um novo alvo farmacológico. As NOXs estão envolvidas em várias patologias como câncer, doenças cardíacas e neurodegenerativas e, portanto, há uma busca intensa por fármacos que inibam a atividade dessas enzimas. Alguns desses inibidores estão comercialmente disponíveis, como o Setanaxib, GKT136901 e VAS2870.Nesse contexto, a fim de investigar se a LFR1 poderá ser um alvo para a terapia medicamentosa contra a leishmaniose, este estudo visa analisar o efeito do Setanaxib, GKT136901 e VAS2870 nas atividades da LFR1 de L. amazonensis e verificar seus efeitos na proliferação, diferenciação e infectividade dos parasitos, bem como análise in silico da interação desses inibidores frente à LFR1.Resultados preliminares usando o reagente Amplex Red^® para medir a produção de H₂O₂ heme-dependente mostraram o Setanaxib a 15 µM, GKT136901 a 2,5 µM e o VAS2870 em concentrações tão baixas quanto 1 µM foram capazes de abolir totalmente a atividade NOX. O efeito citotóxico desses inibidores contra formas promastigotas também foi avaliado através do teste MTT, em que somente o VAS2870 exibiu efeito tóxico, mostrando perda de 20% e 90% da viabilidade celular na presença de 10 µM do inibidor, após 24h e 72h, respectivamente. Na atividade ferro-redutásica da LFR1, medida através de método colorimétrico com o reagente (K₃Fe(CN)₆), o promissor inibidor VAS2870 a 1 µM não mostrou efeito inibitório significativo, porém inibiu essa atividade em concentrações acima de 5 µM. O estudo in silico, que visou demonstrar a possível interação entre o VAS2870 com o domínio desidrogenase de LFR1 modelada comparativamente, mostrou que esse inibidor interage covalentemente com o sítio ativo da enzima de forma estável. Em culturas axênicas que estimulam a diferenciação de promastigotas para amastigotas, o VAS2870 parece atuar inibindo esse processo em concentrações não-citotóxicas, embora não tenha exercido efeito sob a infecção de L. amazonensis em macrófagos murinos. Esses resultados sugerem que o VAS2870 pode atuar em ambas as atividades da LFR1, exercendo efeitos no ciclo de vida de L. amazonensis. Além disso, não é descartada possibilidade de estudos mais profundos a respeito dos efeitos desses e de outros inibidores NOX na LFR1.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 3145590 - DANIELA COSENTINO GOMES
Interno - 2582213 - MARCO ANDRE ALVES DE SOUZA
Interno - 1058758 - MARCO EDILSON FREIRE DE LIMA
Externa à Instituição - MICHELLE TANNY CUNHA DO NASCIMENTO - UFRJ
Externa à Instituição - SUZETE ARAUJO OLIVEIRA GOMES - UFF