Banca de QUALIFICAÇÃO: ERICA RODRIGUES DE MATOS SILVA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : ERICA RODRIGUES DE MATOS SILVA
DATA : 24/10/2022
HORA: 09:00
LOCAL: Virtual
TÍTULO:

Detecção de DNA de Sarcocystis spp. e Neospora caninum em tecidos reprodutivos e sangue de gatos domésticos asselvajados na Ilha Furtada, Mangaratiba, Estado do Rio de Janeiro.

PALAVRAS-CHAVES:

Felinos, Histopatologia, Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), Neosporose, Sarcocistose.

PÁGINAS: 51
RESUMO:

Sarcocystis spp. e Neospora caninum são protozoários intracelulares obrigatórios pertencentes à família Sarcocystidae. Possuem um ciclo heteroxeno, sendo necessário dois hospedeiros para completar o ciclo. A fase sexuada ocorre no hospedeiro definitivo e a fase assexuada no hospedeiro intermediário, dessa forma infectam uma grande variedade de espécies animais. Ambos agentes causam cistos teciduais na musculatura do hospedeiro intermediário. Sarcocystis spp. é o agente etiológico da sarcocistose intestinal, zoonose de grande importância econômica e em saúde pública. Neospora caninum causa a neosporose, doença envolvida em graves prejuízos econômicos na pecuária brasileira e mundial, devido a perdas reprodutivas. A epidemiologia desses coccídios em gatos é pouco conhecida e há escassez de estudos na literatura. Desse modo, o principal objetivo dessa pesquisa é identificar o DNA dos protozoários Sarcocystis spp. e Neospora caninum em gatos asselvajados. As amostras foram cedidas pelo Setor de Anatomia Patológica (SAP) da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) onde será realizado todo o processamento e diagnóstico histopatológico. O sangue total e tecidos reprodutivos são oriundos de gatos castrados da Ilha Furtada, conhecida popularmente como Ilha dos Gatos, localizada no município de Mangaratiba, Costa Verde do Rio de Janeiro. Serão analisadas um total de 54 amostras de tecidos, tais como: testículos, úteros, ovários, placenta e fetos previamente fixados em formol a 10% para a realização das análises histopatológicas. Foram cedidas também informações relevantes como sexo, raça e estágios de vida dos animais para o levantamento de dados. As lâminas serão processadas e coradas com os corantes Hematoxilina e Eosina (HE), em seguida serão analisadas por microscopia óptica. Nos casos em que pelo menos um cisto visualizado for morfologicamente compatível com os protozoários estudados, os tecidos serão considerados histologicamente positivos. O sangue total e fragmentos teciduais destinados ao diagnóstico molecular serão mantidos em microtubos do tipo Eppendorf e congeladas até que as amostras sejam processadas em laboratório. A análise molecular por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) utilizará o kit DNeasy® da Qiagen, para extração do DNA seguindo as orientações do fabricante. Os produtos extraídos serão amplificados no Termociclador Vereti Thermal Cyicler (AB Applied Biosystems). Para eletroforese será usado gel de agarose com concentração de 0,8% (0,8 g de agarose em 100 ml de tampão TAE). Para detecção do gene B1 será utilizado PCR convencional com os seguintes primers:5'-GGA ACT GCA TCC GTT CAT GAG-3' e 5'-TCT TTA AAG CGT. Para leitura e captura das imagens da Nested-PCR será usado um software da Carestream Molecular Imaging (Carestream Health), versão 5.0. Esse é um estudo pioneiro a utilizar tecidos reprodutivos para diagnóstico de Sarcocystis e Neospora caninum e o primeiro a ser realizado com os gatos da Ilha Furtada. É importante para evidenciar possíveis fontes de infecção e a participação desses animais no ciclo dos coccídeos e um possível potencial de transmissão para o homem e demais espécies animais. Assim, espera-se contribuir para que mais estudos acerca do assunto sejam realizados futuramente e servir de informação para patologistas e veterinários como diagnóstico diferencial para demais doenças parasitárias.

MEMBROS DA BANCA:
Interna - 2932766 - ANDRESSA FERREIRA DA SILVA SPYRIDES
Interno - 1151827 - BRUNO RICARDO SOARES ALBERIGI DA SILVA
Interno - 2318733 - DANIEL DE ALMEIDA BALTHAZAR
Externo à Instituição - GIDEÃO DA SILVA GALVÃO