Detecção de DNA de Toxoplasma gondii por meio da PCR em serpentes da espécie Boa constrictor
Toxoplasma gondii, Boa constrictor, PCR.
A detecção molecular de Toxoplasma gondii em répteis neotropicais, especialmente em
serpentes, representa uma lacuna importante na patologia animal e na vigilância
epidemiológica, justificando a urgência em validar métodos diagnósticos para o agente
nessas espécies. Este trabalho teve como objetivo estabelecer e aplicar um fluxo
diagnóstico robusto em duas etapas para identificar o DNA de T. gondii em 13 amostras de
indivíduos da espécie Boa constrictor, utilizando a PCR convencional. A metodologia
empregou uma triagem por pool de tecidos (cérebro, coração, fígado, baço e rim) para
otimizar a sensibilidade, seguida de confirmação em amostras individuais. O protocolo
estabeleceu critérios operacionais rigorosos, classificando os achados em positivos para
bandas nítidas de 529 pb e bandas de baixa intensidade e negativo na ausência de
amplificação específica. Na primeira etapa, a triagem dos quatro pools iniciais revelou a
presença do DNA parasitário em três grupos, o que levou à progressão de 10 amostras
individuais para uma segunda etapa de confirmação. Em síntese, o fluxo analítico
demonstrou ser aplicável e altamente reprodutível em répteis, demonstrando um protocolo
validado e sensível para triagem em B. constrictor. Os resultados obtidos não apenas
confirmam a aplicabilidade da técnica em espécies não convencionais, mas também
reforçam a necessidade da importância do diagnóstico na espécie estudada e na integração
de ferramentas moleculares e patológicas como sequenciamento e correlação
anatomopatológica e sorológica futuras para elucidar o tropismo tecidual e determinar a
verdadeira magnitude da infecção neste importante hospedeiro.