Banca de QUALIFICAÇÃO: LAURA RIBEIRO

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LAURA RIBEIRO
DATA : 16/12/2018
HORA: 00:00
LOCAL: PPGMV / IV / UFRRJ
TÍTULO:

Detecção de Tritrichomonas foetus em Sêmen Bovino Criopreservado através de Isolamento e Reação em Cadeia da Polimerase

PALAVRAS-CHAVES:

tricomonose, diagnóstico, sêmen

PÁGINAS: 13
RESUMO:

A Tricomonose Genital Bovina (TGB), uma doença infectocontagiosa causada pelo protozoário flagelado Tritrichomonas foetus, transmitida por via venérea e também por fômites contaminados, possui grande importância econômica, pois sua principal consequência é o aborto no terço inicial da gestação, além de produzir infertilidade temporária.  Sua presença em um rebanho pode representar até 57% de fêmeas vazias ao fim da estação de monta, configurando enormes prejuízos ao produtor. Em machos a doença é assintomática e permanente, caracterizando os touros como portadores silenciosos e ressaltando o direcionamento do diagnóstico nesta categoria de animais. O diagnóstico é feito, principalmente, por meio dos sinais clínicos e do histórico reprodutivo dos animais e da propriedade, sendo confirmado por testes laboratoriais. A identificação e detecção do protozoário por meio de cultivo microbiológico são tidas como “padrão ouro” dentre as técnicas diagnósticas nas centrais de inseminação artificial (IA) brasileiras. Entretanto, há a possibilidade de resultado falso negativo, sendo necessário o desenvolvimento de técnicas mais sensíveis e eficazes de diagnóstico já que até o momento, a IA é a principal forma de prevenção da TGB nos rebanhos nacionais. O T. foetus já foi encontrado em amostras de sêmen e também é capaz de permanecer viável quando congelado, elevando a IA a um potencial fator de risco quando medidas sanitárias não são aplicadas ou o método diagnóstico é insuficiente. Com base no exposto, este trabalho tem por objetivo analisar a presença de T. foetus em amostras de sêmen bovino comercializado, por meio de cultivo microbiológico e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). O sêmen será comprado de diversas centrais de inseminação, descongelado a 37ºC e visualizado em microscópio para análise das características espermáticas principais e a possível presença de microrganismos. As amostras serão inoculadas em tubos de ensaio contendo meio Diamond, incubadas a 35ºC com consequente avaliação de crescimento e avaliadas a cada 24 horas via exame direto em microscópio. Serão consideradas positivas amostras que contenham a presença de protozoários com formato e motilidade característicos do T. foetus e negativas se após 10 dias de incubação não for observado crescimento do agente. Para a detecção molecular será feita a extração de DNA das amostras em cultivo e para a leitura será utilizado um conjunto de iniciadores baseados na sequência de rRNA 5.8S (TFR3 e TFR4), um controle positivo do DNA de T. foetus da Cepa K extraído de amostra do trato urogenital de um touro positivo (GENBANK AY485677.1) e um controle negativo contendo os mesmos reagentes utilizados na reação das amostras, entretanto, sem inoculação da amostra ou cepa padrão. Os resultados da PCR serão comparados com os obtidos através da visualização direta ao microscópio óptico e do cultivo de cada amostra e correlacionados pelo método do Qui-quadrado para análise estatística.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 2202309 - JULIO CESAR FERRAZ JACOB
Interno - 1548043 - MARCO ROBERTO BOURG DE MELLO
Interno - 6387102 - MARILENE DE FARIAS BRITO QUEIROZ
Externo ao Programa - 387340 - CARLOS WILSON GOMES LOPES
Externo ao Programa - 1354903 - DOUGLAS MCINTOSH