Interação de Trypanosoma rhipicephalis com diferentes linhagens de células embrionárias de Rhipicephalus microplus
carrapato, Trypanosoma, analise molecular, estudo in vitro.
Trypanosoma rhipicephalis é um protozoário da família Trypanosomatidae associado a carrapatos do complexo Rhipicephalus, cujo ciclo biológico e mecanismos de interação com o vetor ainda permanecem pouco compreendidos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a interação in vitro entre T. rhipicephalis e diferentes linhagens celulares embrionárias de Rhipicephalus microplus, investigando a capacidade de manutenção, crescimento e associação do parasito às células do carrapato, bem como realizar sua caracterização molecular de T. rhipicephalis. Foram utilizadas quatro linhagens celulares de R. microplus (RBME6, BME2, BME6 e RME4), infectadas experimentalmente com T. rhipicephalis e acompanhadas por meio de microscopia óptica, microscopia de fluorescência e análises moleculares. Para carcaterização de T. rhipicephalis, foram analisados os marcadores moleculares hsp60, hsp85 e EF1α, com comparação das sequências em bancos públicos e inferência filogenética. As árvores foram construídas por Máxima Verossimilhança, utilizando modelos evolutivos adequados para cada marcador. O perfil de crescimento demonstrou que o parasito foi capaz de se manter em todas as linhagens avaliadas, apresentando diferenças significativas entre elas. A linhagem RME4 apresentou maior crescimento parasitário e maior intensidade de associação parasito-célula, indicando maior permissividade à infecção. As análises de fluorescência evidenciaram aumento progressivo da interação entre parasito e células ao longo do período experimental, sugerindo adesão e possível internalização. Na análise molecular os genes hsp60 e hsp85 posicionaram o isolado de T. rhipicephalis no clado de tripanossomas associados a carrapatos.Já o EF1α apresentou topologia distinta, possivelmente influenciada pela baixa disponibilidade de sequências comparativas, indicando necessidade de novo sequenciamento para confirmação. Os resultados obtidos contribuem para o entendimento da biologia de T. rhipicephalis e reforçam o potencial das linhagens celulares de R. microplus como modelo experimental para estudos envolvendo interação parasito-vetor. Além disso, a linhagem RME4 mostrou-se uma ferramenta promissora para futuras investigações sobre mecanismos de adaptação, transmissão e patogenicidade deste tripanossomatídeo.