ANÁLISE DO TRANSCRIPTOMA DO NÚCLEO DORSAL DA RAFE MEDIANTE DESAFIOS À HOMEOSTASE HIDROELETROLÍTICA E ENERGÉTICA
Transcriptoma, Apetite ao sódio, Privação alimentar
O íon sódio figura como elemento chave na regulação do balanço hidroeletrolítico, de forma que seus níveis devem ser mantidos numa estreita faixa compatível com a vida. Para tal regulação, uma série de mecanismos renais, endócrinos e comportamentais são acionados. O núcleo dorsal da rafe (DRN) tem sido implicado como um importante núcleo encefálico para a modulação do comportamento alimentar, em especial, do apetite específico ao sódio. Neste trabalho nós investigamos as alterações trancriptômicas do DRN em resposta a diferentes desafios à homeostase hidromineral e energética. Ratos Wistar machos com cerca de 60 dias de vida foram randomicamente separados em cinco grupos experimentais: a) controle (CTRL); b) dieta pobre em sódio (DP); c) furosemida (FURO); d) sobrecarga salina (SS); e) privação alimentar. Os animais submetidos ao tratamento com a furosemida e à sobrecarga salina apresentaram aumento significativo no hematócrito (FURO 12,4%; SL 14,9%) e redução (FURO - 1,25%) e aumento (SL 13%) na concentração plasmática de sódio, respectivamente. Já os animais submetidos à privação alimentar apresentaram aumento da osmolalidade plasmática (13%) e redução do peso corporal (12,9%). O sequenciamento de RNA do DRN revelou a expressão de aproximadamente 18.600 transcritos. Dentre os genes mais expressos neste núcleo foram identificados os mRNAs que codificam a triptofano hidroxilase 2 (Tph2), transportador de serotonina SERT (Slc6a4) e o transportador vesicular de monoaminas (Slc18a2), confirmando a prevalência de neurônios serotonérgicos. A comparação dos genes diferencialmente expressos revelou uma alteração significativamente baixa no grupo FURO (6 genes), nenhum gene alterado no grupo DP, e 22 genes alterados pela sobrecarga salina. Entre os 22 genes alterados no transcriptoma, selecionamos 10 alvos para o RT-qPCR, dentre os quais, 7 genes foram validados com sucesso. Por fim, o sequenciamento do grupo submetido à privação alimentar demonstrou 108 genes significativamente alterados. Ao comparar este resultado ao obtido na sobrecarga salina vimos que os grupos apresentam 6 genes comumente alterados (C3, Etnppl, Gjb6, RT1-T24-4, Slc35d3 e Sult1a1). Apesar da necessidade de validar os resultados da privação alimentar pela RT-qPCR, estes dados indicam uma possível convergência entre mecanismos moleculares no DRN para regulação do apetite ao sódio e o comportamento alimentar.