Banca de DEFESA: LAURA RIBEIRO

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : LAURA RIBEIRO
DATA : 15/12/2020
HORA: 14:00
LOCAL: meet.google.com/boa-eupu-shs
TÍTULO:

Detecção de Tritrichomonas foetus em Sêmen Bovino Criopreservado através de Isolamento e Reação em Cadeia da Polimerase

PALAVRAS-CHAVES:

Tricomoníase, biologia molecular, sêmen congelado

PÁGINAS: 25
RESUMO:

A Tricomonose Genital Bovina (TGB), uma doença infectocontagiosa causada pelo protozoário flagelado Tritrichomonas foetus, transmitida por via venérea e também por fômites contaminados, possui grande importância econômica, pois sua principal consequência é o aborto no terço inicial da gestação, além de produzir infertilidade temporária. Em machos a doença é assintomática e permanente, caracterizando os touros como portadores silenciosos e ressaltando o direcionamento do diagnóstico nesta categoria de animais. A identificação e detecção do protozoário por meio de cultivo são tidas como “padrão ouro” dentre as técnicas diagnósticas nas centrais de inseminação artificial brasileiras. Entretanto, há a possibilidade de resultado falso negativo, sendo necessário o desenvolvimento de técnicas mais sensíveis e eficazes de diagnóstico já que até o momento, a Inseminação Artificial (IA) é a principal forma de prevenção da TGB. T. foetus já foi encontrado em amostras de sêmen e também é capaz de permanecer viável quando congelado, elevando a IA a um potencial fator de risco quando medidas sanitárias não são aplicadas ou o método diagnóstico é insuficiente. Com base no exposto, este trabalho teve por objetivo investigar a presença de T. foetus em amostras de sêmen bovino congelado, por meio de cultivo e Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Foram analisadas 27 amostras no total. Uma vez no laboratório, foram descongeladas em água a 37ºC, parte foi inoculada em tubo de ensaio contendo meio Diamond, incubada a 35ºC com consequente avaliação de crescimento e avaliadas a cada 24 horas via exame direto em microscópio e a outra parte diluída em PBS para posterior análise molecular. Após 10 dias de cultivo, todas as amostras foram negativas. Para a detecção molecular foi utilizado o Kit Quick-DNA Miniprep (Zymo Research) sem proteinase K para extração do DNA. Os iniciadores utilizados na PCR foram: TRF1 e TRF2 (primeiro conjunto) e TRF3 e TRF4 (segndo conjunto). O resultado da PCR foi negativo para todas as amostras corroborando com o obtido no cultivo. Conclui-se que as amostras utilizadas foram realmente negativas para a presença do patógeno pesquisado em ambos os métodos diagnósticos, comprovando a inocuidade do sêmen comercial testado.

MEMBROS DA BANCA:
Presidente - 1201559 - VERA LUCIA TEIXEIRA DE JESUS
Interno - 1548043 - MARCO ROBERTO BOURG DE MELLO
Interna - 6387102 - MARILENE DE FARIAS BRITO QUEIROZ
Externa à Instituição - MÁRCIA CRISTINA MENDES
Externo à Instituição - JOAQUIM ESQUERDO FERREIRA - OUTRO