Banca de DEFESA: CLENYA CARLA LEANDRO DE OLIVEIRA

Uma banca de DEFESA de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : CLENYA CARLA LEANDRO DE OLIVEIRA
DATA : 15/09/2023
HORA: 13:30
LOCAL: VIDEOCONFERÊNCIA
TÍTULO:

Obtenção de plantas de arroz (Oryza sativa L.) capazes de metabolizar fosfito como estratégia para aumentar a eficiência de uso de fósforo

PALAVRAS-CHAVES:

Fosfito; ptxD; Superexpressão; Adubação fosfatada.

PÁGINAS: 100
RESUMO:

O fósforo é um dos elementos que mais frequentemente limita o rendimento dos cultivos, sobretudo em solos muito intemperizados. Sua disponibilidade na natureza, no solo e uso eficiente de fertilizantes são preocupações constantes para a prática de uma agricultura sustentável. O maior desafio do uso de adubos fosfatados é sustentar a população mundial em crescimento frente ao fato deles serem um recurso finito, não-renovável, e possuírem reservas concentradas de forma irregular e em poucos países. Diante de tal cenário, desenvolver estratégias para uso mais eficiente do P nos sistemas agrícolas têm motivado muitos pesquisadores da área de ciências agrárias em todo mundo. O objetivo deste trabalho foi produzir plantas modificadas de arroz, capazes de metabolizar o fosfito, ou seja, convertê-lo a fosfato. Neste estudo, foi produzida uma construção genética, em que o gene PtxD de Pseudomonas stutzeri foi sintetizado com ajuste de códons para arroz (Oryza sativa L) e colocado sob o controle do promotor da ubiquitina 1 de milho, o que garante uma expressão forte e constitutiva do gene em arroz.  Calos embriogênicos originados do escutelo de sementes maduras de arroz foram infectados com Agrobacterium tumefaciens carregando a construção genética ZmUBIL1:PtxD:t-NOS. O marcador de seleção usado foi o gene que codifica a higromicina fosfotransferase (hpt), enzima capaz de degradar o antibiótico higromicina. Após seleção dos calos resistentes, 44 linhagens transgênicas foram regeneradas in vitro, aclimatadas em câmara de crescimento de plantas e levadas para casa de vegetação até obtenção das sementes da primeira geração (T₁). Durante o cultivo das linhagens, amostras de folhas foram coletadas e o DNA extraído para confirmação da transformação, que ocorreu por meio de reação de PCR para amplificar o gene PtxD e outros segmentos da construção genética. As linhagens que se mostraram positivas foram cultivadas novamente para produção de sementes da geração (T₂) e identificação de plantas homozigotas para construção. A habilidade das plantas transformadas para metabolizar o fosfito foi testada pelo cultivo em solução nutritiva contendo fosfito 0,2mM como única fonte de P. Três linhagens foram selecionadas pela capacidade de se desenvolverem satisfatoriamente em solução nutritiva com fosfito como única fonte de P.

MEMBROS DA BANCA:
Interno - 2213075 - EVERALDO ZONTA
Presidente - 2626406 - LEANDRO AZEVEDO SANTOS
Externo à Instituição - LEANDRO MARTINS FERREIRA - IFMT